1941年11月28日，蘇南日軍3000余兵力在炮兵和騎兵配合下，合擊新四軍第十六旅旅部和蘇南黨政機關駐地溧陽塘馬村。新四軍第六師參謀長兼十六旅旅長羅忠毅、十六旅政委廖海濤指揮部隊阻擊敵人，在掩護黨政機關1000余人安全轉移后，羅、廖等人陷入敵軍重圍之中。羅、廖等270余名指戰員在激戰中英勇犧牲。戰后，譚震林師長到達16旅整頓部隊，譚震林兼旅長，鐘國楚任政委，使該旅迅速恢復了戰斗力，頑強堅守了蘇南抗日陣地。1942年底，新四軍第一師第二旅奉命南下蘇南，翌年1月與第十六旅合編，王必成任第十六旅旅長，江渭清任政委。全旅有5000余人。合編后的第十六旅轉移到溧武公路以北敵后地區活動，進逼南京近郊青龍山、方山等地，引起日偽軍的驚恐，“掃蕩”更加頻繁。日軍集中數千兵力先后“掃蕩”江寧、句容地區、橫山地區、茅山地區、丹金武地區、溧水和溧陽地區，妄圖肅清南京外圍及滬寧鐵路兩側的新四軍。第十六旅以分散的游擊戰術，在敵后與敵人作艱苦的糾纏斗爭，堅持了蘇南根據地。
1943年9月底，日軍集中萬余兵力分兵3路，從蘇南、皖南、浙西向溧陽、廣德、郎溪、宣城發動進攻。駐防在這一帶的國民黨軍10多個團聞風而逃，使宣長公路以北廣大地區淪陷。新四軍第十六旅尾敵跟進，收復失地，并以主力一部挺進郎溪、廣德敵后，開展游擊戰爭，建立抗日游擊根據地。11月20日至23日，第十六旅發起溧高戰役，先后攻克溧水境內的東流、新橋和高淳境內的漆橋等據點。溧高戰役的勝利，不僅打破了日偽軍在這一地區推行偽化的計劃，而且打通了蘇南擾日根據地與郎廣地區抗日游擊根據地聯系。12月，建立了中共郎溪、廣德、高淳縣委和抗日民主政府。至此，以茅山為中心的蘇南抗日根據地有了很大發展，北起長江，南至宣長公路，東臨太湖，西至當涂、蕪湖的廣大區域內，除城鎮及鐵路、公路線為日偽軍占領外，廣大鄉村均為新四軍控制。